無(wú)菌室應根據既經(jīng)濟又科學(xué)的原則來(lái)設置。其基本要求有以下幾點(diǎn)：

1.無(wú)菌室應有內、外兩間，內間是無(wú)菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過(guò)大，以便于空氣滅菌。內間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應有天花板。

2.內間應當設拉門(mén)，以減少空氣的波動(dòng)，門(mén)應設在離工作臺更遠的位置上；外間的門(mén)也用拉門(mén)，要設在距內間更遠的位置上。

3.在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上，應開(kāi)一個(gè)小窗，作接種過(guò)程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進(jìn)出內間的次數，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都掛對拉的窗扇。

4.無(wú)菌室容積小而嚴密，使用一段時(shí)間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進(jìn)門(mén)處的頂棚上（即離工作臺更遠的位置），為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開(kāi)啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。

無(wú)菌室工作規程

1.無(wú)菌室滅菌。每次使用前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈照射30min以上，或在使用前30min，對內外室用5%石炭酸噴霧。

2.用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。

3.將各種需用物品搬進(jìn)內室清點(diǎn)、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進(jìn)內室工作。

4.接種操作前，用70%酒精棉球擦手；進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)，動(dòng)作要輕緩，盡量減少空氣波動(dòng)和地面揚塵。

5.工作中應注意安全。如遇棉塞著(zhù)火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒；如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時(shí)，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續操作。

6.工作結束，立即將臺面收拾干凈，將不應在無(wú)菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無(wú)菌室后，對無(wú)菌室用5%石炭酸噴霧，或開(kāi)紫外線(xiàn)燈照射30min。